Работа 1. Приготовление питательной среды (выполняется кружковцами или преподавателем)

Приведем один из вариантов прописей питательных сред. В 1 л горячей воды размешивают 60 г пекарских прессованных дрожжей^*. Затем добавляют 40 г очищенного, вымытого и дважды провернутого через мясорубку изюма. Варят 15 мин, непрестанно помешивая. Одновременно в смесь высыпают 36 г манной крупы и размешивают 50 мл патоки. Варят 1 ч.

^* (Пекарские дрожжи можно заменить сухими с учетом того, что пекарские дрожжи содержат 75% воды.)

Добавляют 8 г предварительно набухшего в воде агар-агара и продолжают варку приблизительно 15 мин, пока агар полностью растворится. В снятую с огня смесь добавляют 8 мл пропионовой кислоты, хорошо помешивая.

В тщательно вымытую, прогретую в сушильном шкафу при температуре 100-120°С пробирку с плоским дном (сахарный стаканчик) емкостью в 100 мл, диаметром 2-3 см и высотой 6-8 см аккуратно (не попадая на стенки) наливают несколько охлажденную (до 60-70°С) среду. Розлив производят при помощи пипетки или, укрепленной в штативе небольшой воронки (диаметром около 15 см), с натянутой на конец резиновой трубки с зажимом Мора.

После полного остывания в пробирке поверхность среды смачивают (кисточкой или при помощи пульверизатора) дрожжевым молочком (дрожжи, разведенные в кипяченой воде). Чтобы мухи не прилипали к влажной поверхности, в стаканчик насыпают немного мелко нарезанной бумаги (или конфетти). Пробирки должны быть плотно закрыты ватными тампонами, предварительно простерилизованными (особенно если они были в употреблении) в автоклаве. Заготовленную таким образом среду можно хранить при необходимости, несколько дней в холодильнике.

Рис. 63. Морилка. 1 - воронка; 2 - пробка; 3 - капсула с отверстиями; 4 - вата, смоченная эфиром

В каждый стаканчик помещают 3-4 пары дрозофил, предварительно наркотизированных эфиром в специальных морилках. Морилки могут быть разного устройства. На рис. 63, изображена одна из модификаций морилок. В капсулу (3), постукивая по пробирке, осторожно высыпают дрозофил. Как только они перестают двигаться их следует тотчас вытряхнуть на матовое стекло, так как через 3-5 мин наркоза мушки погибают. Характерным признаком гибели их являются поднятые под углом 45° крылья.