X.1.2. Учет рецессивных летальных мутаций, локализованных в аутосомах, у дрозофилы
Летальные рецессивные мутации, возникающие в аутосомах дрозофилы, можно учитывать с помощью линий-анализаторов со сбалансированными леталями по второй и третьей хромосомам (см. гл. VII) и инверсиями. Сбалансированные хромосомы маркируются теми же доминантными с рецессивным летальным действием генами, которые используются при определении группы сцепления, например, CyL/Pm и D/Sb.
Для обнаружения и количественного учета летальных рецессивных мутаций, возникающих во второй хромосоме, скрещивают самок из линии-анализатора CyL/Pm с самцами, обработанными мутагеном. Особи F1 получают одну хромосому - 2 от самки линии-анализатора (например CyL), другую - от мутагенизированного самца. Эта хромосома может нести рецессивную летальную мутацию (или не иметь ее). Рецессивная мутация, локализованная в аутосоме, проявится только при скрещивании гетерозигот по этой мутации. Для их получения проводят индивидуальные скрещивания самцов F1 (у них не идет кроссинговер) с фенотипом CyL* с самками из линии-анализатора CyL/Pm.
* (Если анализируется крыловая мутация, то используют самцов из F1 с фенотипом Pm.)
Если самец F1 гетерозиготен по рецессивной летальной мутации (CyL/1), то все потомки этого скрещивания становятся гетерозиготными по летальной мутации, так как хромосому с сигнальными генами (Cy и L) они получают от самок CyL/Pm, а от самца - хромосому с летальной мутацией. Если самец Cy/L из F1 не имеет в генотипе летальной мутации, то все его потомки также окажутся без летали.
Рис X.3. Метод обнаружения и количественного учета рецессивных летальных мутаций в аутосоме (во второй хромосоме) у дрозофилы
Для того чтобы установить, какие самцы F1 имели летальные мутации во второй хромосоме, потомков F2 каждого индивидуального скрещивания скрещивают между собой для получения F3, где и производят учет летальных мутаций. При наличии мутации в исследуемой хромосоме в F3 не будет мух дикого типа. Расчет частоты возникновения мутаций также проводится от числа исследованных хромосом (рис. X.3.). Таким же образом могут быть учтены рецессивные летальные мутации в третьей хромосоме. При этом используется линия, маркированная по третьей хромосоме - D/Sb.
Летальные мутации могут служить критерием оценки мутагенного действия разных мутагенов, так как они появляются чаще, чем видимые мутации, а по механизму возникновения они не различаются.