Правила работы и безопасность

В большинстве экспериментов, излагаемых в этом руководстве, используется Salmonella typhimurium. После многих лет культивирования в лабораторных условиях штамм LT2 S. typhimurium (из которого получены все используемые здесь штаммы), по-видимому, уже более не патогенен для человека, хотя и происходит от штаммов, которые несомненно были способны вызывать диарею. За много лет использования в лабораториях S. typhimurium LT2 ни разу не сообщалось о случаях инфекции, хотя известно о нескольких случаях заражения людей сходными штаммами (например, LT7 или 1559). Штамм LT2 оказывается ослабленным также и для мышей, хотя в высоких дозах может еще их убивать.

Поэтому все эксперименты следует проводить, пользуясь обычными благоразумными приемами работы с бактериями. Стеклянную посуду, находившуюся в контакте с культурами, прежде чем мыть, необходимо стерилизовать. Стерилизовать нужно и сами культуры. Отходы (чашки Петри) нужно перед их удалением стерилизовать или сжигать дотла. Следует запретить засасывать материал в пипетки ртом, хотя мы спокойно относимся к пипетированию разведенных суспензий бактерий (и фагов) ртом.

Некоторые эксперименты, приведенные в данном руководстве, включают опыты с рекомбинантными ДНК. Такие опыты, однако, не подпадают под действие Правил по работе с рекомбинантными ДНК Национальных институтов здравоохранения (НИЗ), так как известно, что и в обычных условиях могут образоваться рекомбинанты между S. typhimurium и E. coli за счет рекомбинации между их хромосомами. Тем не менее при работе с рекомбинантами мы принимаем те же меры предосторожности, что и при работе с самой Salmonella.

При использовании ДНК, выделенной из организмов, отличных от Salmonella, описанные здесь эксперименты могут подпадать под правила НИЗ, и перед тем, как их проводить, нужно познакомиться с этими правилами. Все штаммы, используемые нами в качестве клеток-хозяев для рекомбинантных ДНК, являются производными E. coli K12. Поэтому фактически все незапрещенные эксперименты требуют самое большее Pl-уровня физической защиты.