VII.1.6. Локализация гена с помощью инверсий

У мышей самки и самцы гомо- и гетерозиготные по инверсии жизнеспособны и фертильны. Это обстоятельство позволяет использовать инверсии для улавливания рецессивных летальных и видимых мутаций и одновременно локализовывать их в группе сцепления. В генотип мышей дикого типа вводят большую инверсию, захватывающую область определенных генетических маркеров, локализованных в какой-либо хромосоме, например в 1. Тестерная линия в этой хромосоме содержит маркеры со сбалансированными леталями, хорошо проявляющимися фенотипически, и несколько рецессивных мутаций, которые могут служить сигналями при локализации гена. Самцов дикого типа, гомозиготных па инверсии, обрабатывают мутагеном и скрещивают с самками из тестерной линии. Маркерами по 1 хромосоме (XIII группа сцепления) могут быть гены: Sp - Splotch - обусловливающий развитие белых пятен на брюхе - доминантная мутация с рецессивным летальным действием, In - leaden - окрашенная шерсть и а - nonaguti - отсутствие желтой полосы на волосе (фенотип неагути). В первом поколении получают особей гетерозиготных по инверсии, что делает невозможным прохождение кроссинговера в области локализации генов-маркеров.

Среди потомков F₁ половина мышат имеет в генотипе одну хромосому с инверсией и гомологичную ей хромосому с сигнальными генами. Другая половина мышат имеет нормальный (дикий) фенотип, а также содержит инверсию. Далее возвратно скрещивают самок и самцов с фенотипом Sp с особями из тестерной линии (индивидуальные скрещивания), а также получают F₃.

Если в гаметах облученных самцов нет мутации (или она возникает в другой хромосоме), то в F_b и в F₃ вновь рождаются мышата с фенотипами Sp и дикого типа в соотношении ²/₃:¹/₃ соответственно, так как гомозиготы по Sp летальны. Если в гаметах облученных самцов возникает видимая рецессивная мутация в 1-й хромосоме, то она проявляется в F3: ²/₃ особей будет иметь фенотип Sp, ¹/₃ - мутантный фенотип.

Рис. VI 1.2. Использование инверсии для выявления и локализации рецессивных видимых и летальных мутаций у мышей. Схема анализа, In - инверсия, m - мутация

Если в этой хромосоме возникнет рецессивная летальная мутация, то в F_b появятся только мыши с фенотипом Sp (рис. VII.2).

Таким образом, метод позволяет локализовать мутацию в определенной группе сцепления; более того он дает возможность сделать заключение о локализации мутации вблизи инвертированного участка.