1.3. Краткая биохимия и тканевая локализация HLA-антигенов

Антигены гистосовместимости выделяются с клеточных мембран обычными иммунохимическими методами [Strominger J. et al., 1977; Albert E., Goetze D., 1977]. На основании современного биохимического анализа молекулярная структура антигена гистосовместимости представляется так, как она изображена на рис. 4 [Strominger J. et al., 1977]. В настоящий момент считается, что HLA-детерминанта состоит из двух полипептидных цепей - тяжелой (мол. масса 39 - 44тыс.) и легкой (мол. масса 12 тыс.). Тяжелая цепь кодируется HLA-А,В,С-генами и связана с серологически выявляемыми антигенами. Легкая цепь представляет собой β₂-микроглобулин (β₂m) и является иммуноглобулиновым доменом [Bender К., 1979], выражая связь HLA-структур с иммуноглобулинами. Последовательность аминокислот на конце тяжелой цепи (см. рис. 4) определяет специфичность антигенной детерминанты. Несколько лет назад удалось частично выяснить последовательность аминокислот тяжелой цепи [Ballow В. et al., 1976].

Рис. 4. Структура HLA-антигенов (на основе иммунохимических данных Т. Strominger et al., 1977; Е. Albert и D. Goetze, 1977). 1 - тяжелая цепь, представленная HLA-полипептидами; 2 - легкая цепь, представленная β₂-микроглобулином; 3 - клеточная мембрана; 4 - гидрофобная часть; 5 - гидрофильная часть

Как предполагают, HLA-DR-антигены имеют во многом сходное строение, полипептидные цепи их почти равновесны [Snary D. et al., 1977], имея мол. массу 35 и 28 000, и у них отсутствуют "переплетения" с β₂-микроглобулином [Jones Е. et al., 1975; Wernet P., 1976].

Молекулы HLA расположены на внешней поверхности клеточной мембраны, что следует из самого распространенного метода их идентификации - серологических реакций.

Основным методом, используемым для оценки плотности HLA-антигенов в различных тканях, является метод количественной адсорбции их соответствующими тканевыми гомогенатами с последующей оценкой титра HLA-антител. Ранее было показано, что HLA-антигены можно определить на клеточной мембране практически всех ядросодержащих клеток, в частности на всех клетках крови человека: лимфоцитах, гранулоцитах, моноцитах, тромбоцитах, ретикулоцитах и в небольшом количестве на эритроцитах. Это обстоятельство особенно важно для клинической иммуногенетики, так как кровь - одна из немногих тканей человека, доступная для прижизненного клинического исследования. В практических целях можно также использовать жидкости человека - мочу, женское молоко, которые содержат молекулы или гаптенные детерминанты HLA. НLА-А,В,С-антигены экспрессированы на человеческих опухолевых линиях [Pollack М. et al., 1980].

HLA-D-детерминанты открываются на В-лимфоцитах, моноцитах; HLA- DR-антигены, как тесно связанные с HLA-D-детерминантами, также определяются на В-лимфоцитах.

В нормальной ситуации на периферических Т-лимфоцитах и тромбоцитах DR-антигены не обнаруживаются. Однако при определенных видах активации Т-лимфоцитов у них установлена экспрессия DR- антигенов на мембране. Описан синтез и экспрессия HLA-DR-антигенов на Т-лимфоцитах, активированных смешанной культурой лимфоцитов [Evans R. et al., 1978] или митогенами [Ко М. et al., 1979; Greaves М. et al., 1979]. J. Kornbluth и В. Dupont (1980) показали, что Т-лимфоциты, первично стимулированные в MLC, затем клонированные и способные к специфической цитолитической активности, экспрессируют на мембране DR-антигены, соответствующие D-антигенам гомозиготных типирующих клеток, участвовавших в стимуляции.

Сведения о распределении HLA-DR-антигенов не на клетках крови пока не отличаются значительной полнотой. Однако показано, что они экспрессированы на ткани почки [Williams К. et al., 1980], эпидермисе кожи человека [Hirshberg Н., Thorsby Е., 1976], сосудистом эпителии человека [Mordes J., Stastny P., 1977; Hirshberg H. et al., 1980]. По-видимому, они могут быть экспрессированы на тканях многих внутренних органов, включая кишечный тракт, печень, дыхательные и мочевыводящие пути [Forsum Н. et al., 1979].

Наиболее точное сравнительное исследование плотности антигенов HLA на тканях проведено в последние годы К. Williams с соавт. (1980), которые использовали моноклональные антитела к HLA-A,В,С и HLA-DR-антигенам. Авторы произвели количественную адсорбцию моноклональных антител, после чего содержание их было оценено по радиоиммунному связыванию.

За эталон (100%) принимали содержание антигенов обоего типа в селезенке. Плотность HLA-антигенов в органах представлена в табл. 3.

Таблица 3

Pellegrino М. et al. (1978) показали, что экспрессия HLA-A, B, C- антигенов на мембране В-лимфоцитов почти в 3 раза выше, чем на Т-лимфоцитах.