5.8. Другие классы ядерных РНП-частиц

Хотя выше мы отмечали гомогенность ядерных РНП-частиц, из этого общего правила есть исключение. Оно касается 3'-концевой последовательности поли (А), присоединяющейся к гяРНК после завершения транскрипции и отсечения лишнего 3'-концевого фрагмента (созревание 3'-конца мРНК). Впервые частица, содержащая поли (А) - конец гяРНК, была описана О. П. Самариной и Ж. Бессоном, которые обнаружили поли (А) в составе поличастиц, но не нашли ее в 30S-частицах (рис. 40). Тогда они просмотрели все фракции вдоль сахарозного градиента и обнаружили поли (А) в составе компонента с константой седиментации 14S. Было ясно, что эти частицы отщеплялись от нативных РНП-комплексов при действии РНКазы; 14S частицы были далее очищены и определен их полипептидный состав. Оказалось, что они не содержат информатина, но в них открывается характерный набор из нескольких других полипептидов. По крайней мере, один из них сопровождает мРНК при ее переносе в цитоплазму. Помимо про-мРНП (или гяРНП), рядом авторов, начиная с х. Буша и Т. Педерсона (США), в клеточном ядре были выявлены РНП-частицы другого типа, а именно мяРНП, содержащие малые ядерные РНК. В настоящее время описано 7 мяРНК, обозначаемых как Ul, U2 и т. д. Большая часть их синтезируется РНК-полимеразой II и содержит кэпы. Размеры мяРНК составляют от 80 до 250 нуклеотидов. В состав мяРНК, помимо РНК, входит несколько полипептидов, среди которых есть полипептиды, характерные для данного РНП, и полипептиды, общие для нескольких разных РНП. Это показано с помощью иммунного анализа с использованием сыворотки пациентов с некоторыми видами красной волчанки, у которых вырабатываются антитела к белкам мяРНП.

Рис. 40. Выявление особых частиц, включающих в свой состав поли (А), находящиеся на 3'-концах гяРНК. а, б - распределение поли(А) вдоль сахарозного градиента после ультрацентрифугирования ядерных РНП-частиц, выделенных без добавления ингибитора РНКазы (а) и с ингибитором РНКазы (б). Видно, что поли (А) входит в состав тяжелых полирибонуклеосом, но ее нет в 30S-частицах. Вместо этого поли (А) входит в состав НБ-компонента; в - очистка HS-частиц, содержащих поли (А), путем повторного ультрацентрифугирования в сахарозном градиенте

Обычно мяРНП ассоциируются с нативными комплексами про-мРНП, что служит указанием на их возможную роль в процессинге (см. ниже).

Рис. 40. Выявление особых частиц, включающих в свой состав поли (А), находящиеся на 3'-концах гяРНК. г - очистка 14Б-частиц ультрацентрифугированием в градиенте плотности сульфата цезия

Наконец, следует упомянуть, что в составе ядрышек выявляются частицы, содержащие 45S-pPHK, т. е. про-рРНК, и ряд производных частиц. В них наряду с некоторыми рибосомными белками присутствуют чисто ядерные белки, которые, очевидно, участвуют в процессинге рРНК и созревании рибосом. Поскольку, однако, биогенез рибосом не является предметом изложения, я не останавливаюсь на деталях их организации.

Рис. 40. Выявление особых частиц, включающих в свой состав поли (А), находящиеся на 3'-концах гяРНК. д - сравнение полипептидного состава 145-поли(А)-частиц (сверху) и 30S-рибонуклеосом (внизу) с помощью гель-электрофореза в присутствии додецилсульфата натрия (сканирование электрофореграмм, окрашенных бромфеноловым синим). Материал выделяли из ядер печени крысы (по результатам, полученным О. П. Самариной и соавт.)