Список штаммов

Все штаммы, кроме обозначенных особо, являются штаммами Salmonella typhimurium.

Эксперимент 1 NK337 hisC527 leu-414 supE (P22 c2ts29 12amNll 13amH101 int-3 Tn10)
              LT2

Эксперимент 2 TR 5989 (purB12)
              Пул клонов с транспозициями Tn10 (10000)
              P22 (HT, int-)

Эксперимент 3 TT1127 (hisC8667 :: Tn10, ориентация В)
              TT1151 (hisC8691 :: Tn10, ориентация А)
              TT513 (zee-2 :: Tn10, ориентация А)

Эксперимент 4 TT5371 (zeh-754 :: Tn10); частота контрансдукции
              Tn10 с hisW составляет 90%.
              Фаг P22 (HT, int-), выращенный на TT5371 и мутагенизированный
              Клетки LT2

Эксперименты 5 и 6 DB4383 (E. coll) sup° gal-1 gal-2 SmR lac- AmpR
                   DB6430 (E. coli) argEam RifR/NalRΔ(lac pro)
                   DB6431 = DB6430 metB- supD (su1+, вставляет серии)
                   DB6432 = DB6430 metB- supE (su2+, вставляет глутамин)
                   DB6433 = DB6430 metB- supF (su3+, вставляет тирозин, называется также tyrT)
                   DB6434 = DB6430 metB+ supP (su6+, вставляет лейцин)
                   DB6435 = DB6430 metB- supG (su5+, вставляет лизин)
                   DB6436 = DB6430 metB- supB (вставляет глутамин)
                   DB6437 = DB6430 metB- supC (вставляет тирозин)
                   λamp = λc1857 b515 b519 intam29 Tn2
                   λcIl857 b515 b519 nin5 intam29
                   BNN45 (см. эксперимент 8)
                   λcII857 ind+

Эксперимент 7

Все приведенные выше his-мутанты для роста на минимальной среде нуждаются лишь в гистидине. В скобках указаны дополнительные мутации (ни одна из них не приводит к ауксотрофности). Перед использованием каждый штамм нужно рассеять до отдельных колоний и проверить на потребность в гистидине. В качестве контролей используется донорный фаг, выращенный на LT2 (his⁺, дикий тип) и TR5998 (his-3050, деления всего оперона his). В качестве контрольного реципиента используйте также TR5998. В качестве дополнительного контрольного реципиента можно использовать какой-нибудь неродственный ауксотроф (например, purB64 или purF145 из эксперимента 13); лизаты фагов, выращенных на всех донорных штаммах, должны образовывать рекомбинанты с этими ауксотрофами.

Эксперимент 8 λgt7-ara6
Пул гибридов  λgt7c EcoR1-фрагментами ДНК S. typhimurium
    λgt4-lac5
    RD100 (E. coli) hisB463
    BNN45 (E. coli) hsdR- hsdM+ supE44 (su2+) supF (su3+) Bl- met-

Эксперимент 9 λgt5-lac5, pBR322
    BNN45 (см. эксперимент 8)

Эксперимент 10 См. эксперимент 7
    RD101 = E. coli HB101 (pBR322-hisOGD)

Эксперимент 11 DB5681 (E. coli) thi-1 (Bl-) lop-8
    (суперпродуцент лигазы) (λimm434 cI-ts Sam7)

Эксперимент 12 HB101 (E. coli) hsdR- hsdM- recA13 supE44 
(su2+) lacZ4 leuB6 proA2 thi-1 (B1-) SmR
    RD102 = HB101/λ (устойчив к адсорбции фага λ)
    RD103 = HB101 (pBR322)

Эксперимент 13

Эксперимент 13

          
Методика 3 P22 (HT, int-)

Методика 5 NK337 (см. эксперимент 1)
           TR4368 his-644 (P22 sieA27)
           P22-503 (c1-7 12amN114 13amH101)
           TR248 cysA1349am hisC527am
           TR251 cysA1349am hisC527am supD (sul+)

Методика 7 См. эксперименты 5 и 6

Методика 9 λc1857 b515 b519 nin5 intam29
           λamp = λcI857 b515 b519 intam29 Tn2

Методика 11 DB5681 (см. эксперимент 11)
            DB5683 (E. coli) thi-1 (Bl-) (λcl857 Sam7)

Методика 14 Подробное описание структур см. в приложении 92
            λgtl-λB
            λgt4-O
            λgt5-lac5
            λgt7-ara6
            λgt7-lacb
            λ607
            λsep6-lac5, lac5
            Харон 4
            λ590
            λ760
            λgt30-Ec6
            λgt40-λB

Методика 15 RD104 = E. coli C600 hsdR- hsdM-
            A: E. coli N205 recA- (λimm434 cI-ts b2 red3 Eam4Sam7)
            B: E. coli N205 recA- (λimm434 cI-ts b2 red3 Dam15Sam7)

Методика 16 SF8 (E. coli) hsdR- hsdM- recB recC lop-11 (суперпродуцент лигазы) supE44
(su2+) gal-96
            SmR leuB6 thi-1 (Bl-) thr-
            HB101 (см. эксперимент 12)
            BNN45 (см. эксперимент 8)

Методика 17 RD102 = HB101/λ (см. эксперимент 12)

Методика 18 HB101 (см. эксперимент 12)
            RD102 = HB101/λ (см. эксперимент 12)
            BNN45 (см. эксперимент 8)
            SF8 (см. методику 16)

Методика 19 BNN45 (см. эксперимент 8)
            RD105 (E. coli) trpC9830

Методика 20 E. coli 594 (λpolA cI857 nin5 Qam73 Sam7)
            E. coli E1150 (λWam Eam T4lig cl857 nin5 Sam100)