НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Обсуждение

Помимо чашек Red существует несколько других способов выявлять наличие или отсутствие β-лактамазы. Один из них состоит в том, чтобы лизогенизировать испытуемым фагом какого-нибудь хозяина, а затем определять устойчивость полученной лизогенной бактерии к ампициллину. Это можно сделать полуколичественною, если использовать разные концентрации этого лекарственного препарата. Для этого испытуемый фаг нанесите штрихом на газон чувствительной к ампициллину (AmpS) клетки-хозяина (например, BNN45) или просто нанесите каплю этого фага на газон. В данном конкретном случае фага λamp (который несет амбер-мутацию в гене int) клетка-хозяин должна содержать также супрессор supE или supF. Инкубируйте чашки в течение ночи при 34°С (фаг λamp обладает температурочувствительным репрессором cI857). На следующий день уколом зубочистки в центр пятна от капли или в центр бляшки (где находятся лизогенные бактерии) отберите лизогенные клетки и перенесите его на чашку LB + ампициллин, на чашку LB и (чтобы сохранить фаг) на чашку для фага λ с газоном любой чувствительной к фагу λ клетки-хозяина. На чашки LB и LB + ампициллин бактерий не добавляют, так как на них проверяют устойчивость лизогенных бактерий к ампициллину. А на чашки с фагом λ высевают клетки в мягком агаре, так что фаг на них будет сохранен.

Второй метод заключается в том, что суспензию фага капают прямо на газон клеток AmpS (например, BNN45) на чашке LB + ампициллин. Клетки в этом пятне вырастут лишь в том случае, если фаг может лизогенизировать и передавать устойчивость к ампициллину.

Третий метод состоит в использовании хромогенного субстрата с β-лактамовым кольцом (87/312 или нитроцефина). Им можно действовать непосредственно на бляшки или колонии.

предыдущая главасодержаниеследующая глава






Генетики нашли в ДНК мужчин следы древней «войны кланов»

Европейцы и азиаты посветлели независимо друг от друга

Современные высшие растения возникли в результате сдвига экспрессии генов

Генетики нашли «семью», состоящую из 13 миллионов человек

Прочитали рекордный по длине геном мексиканской амбистомы - 32 миллиарда пар нуклеотидных оснований

ДНК человека, умершего в 1827 году, восстановили без его останков

Генетики изучили жителей Новой Гвинеи

Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru