НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Методика

  1. Исходя из отдельных колоний, получите жидкие культуры каждого из делеционных his-мутантов и контрольного делеционного мутанта purFXAb (TR5663) или pyrB64 (TR5671). (Эти неродственные ауксотрофы имеются среди штаммов, которые используются в эксперименте 13.)
  2. Разотрите по 0,1 мл каждого мутанта по трем чашкам (Е + 0,005 мМ гистидина). Подождите, чтобы жидкость полностью впиталась. На поверхность чашки скрещивания можно сразу нанести капли 25 разных препаратов фага, если пользоваться ящиком Бертани (матрицей), в ячейки которого внесены препараты набора донорных фагов. Делают это с помощью "паука" (штампа с 25 металлическими палочками). Пока капли не впитаются, чашки не переворачивайте. Если нет таких матриц, то капли фага можно аккуратно нанести на газон реципиента пипеткой. Инкубируйте чашки в течение двух суток при 37°С. Приготовьте одну чашку, содержащую только фаги (т. е. нанесите их на чашку без бактерий-реципиентов).
  3. Просмотрите чашки и выявите, в каких пятнах контакта донорного фага с газоном делеционного реципиента имеются рекомбинанты. Исходя из полученных данных, постройте по возможности более точную карту использованных мутаций. Если имеющиеся данные не позволяют построить однозначную карту, то следует повторить некоторые скрещивания с более высоким разрешением (нанося 0,1 мл суспензии фага и 0,1 мл ночной культуры на целую чашку).
предыдущая главасодержаниеследующая глава






Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru