НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Обсуждение

  1. (Этап 2); среда для картирования делеций содержит низкую концентрацию гистидина, так что реципиенты могут расти в течение нескольких делений. В результате повышается количество трансдуктантов, а тем самым и разрешение картирующих скрещиваний. В качестве положительного контроля, показывающего эффективность применяемых фаголизатов, использован реципиент pur B (или pur F). В качестве негативного контроля использован реципиент с делецией his-3050, в результате которой удаляется весь his-оперон. Такие картирующие скрещивания обладают повышенной чувствительностью, так как для трансдукции использован мутант фага P22. Этот мутант несет мутацию (HT), которая сильно повышает вероятность включения материала клетки-хозяина в головки фага (Schmieger, 1972). В лизате такого мутанта около половины фаговых частиц содержат ДНК клетки-хозяина (Susskind and Botstein, 1978). Те чашки, которые будут использоваться в скрещиваниях такого типа, полезно предварительно инкубировать в течение ночи при 37°С. Они подсохнут, и капли фага быстрее впитаются, что позволит избежать слияния нанесенных на чашку капель.
  2. (Этап 3); если в пятнах на контрольной чашке нет колоний, то пятна скрещивания можно считать положительными (т. е. указывающими на то, что рекомбинация происходит), даже если в них оказалось лишь по одной колонии. Обычно такой слабый ответ нуждается в подтверждении, для чего проводят скрещивание на целой чашке (0,1 мл суспензии фага и 0,1 мл полностью выросшей жидкой культуры растирают по всей селективной чашке).

Литература

Hartman P., Hartman Z., Stahl R., Ames B. N., 1971. Classification and mapping of spontaneous and induced mutations in the histidine operon of Salmonella, Adv. Genet., 16, 1.

Hoppe I., Johnston H. M., Biek D., Roth J. R., 1979. A refined map of the hisG gene of Salmonella typhimurium, Genetics, 92, 17.

Schmieger H., 1972. Prage P22 mutants with increased or decreased transducti on abilities, Mol. Gen. Genet., 119, 75.

Susskind M. M., Botstein D., 1978. Molecular genetics of bacteriophage P22 Microbiol. Rev., 42, 385.

предыдущая главасодержаниеследующая глава






Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru