НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Методика

1. Рассейте штрихом до отдельных колоний штамм RD103-HB101 (pBR322).

Проверьте штамм RD103 на устойчивость к тетрациклину и ампициллину. Проверенную культуру сохраните. Посейте 100 мл ночной культуры RD103.

Выделение ДНК pBR322

2. Следуя методике 12-I, выделите плазмидную ДНК из 100 мл культуры HB101 с плазмидой pBR332. Используйте объемы для одной пробирки от ротора 50 Ti.

Из градиента отберите ДНК pBR322 и экстрагируйте из нее бромистый этидий. Осадите ДНК этиловым спиртом или диализуйте ее против 0,1 M NaCl, 0,05 М и трис (рН 7,5) и 0,1 мМ Na2-ЭДТА.

Вырастите ночные культуры штамма RD102-HB101/λ.

Выделение ДНК фага λ

3. Следуя методике 11-I, выделите ДНК фага λ, используя примерно половину препарата фага.

Перенесите фрагмент (фрагменты) ДНК из фага λ, в плазмиду pBR322. Расщепите ДНК рестриктазой EcoRI или смесью рестриктаз. Возьмите 20-50 частей (по весу) ДНК гибридного фага λ, на 1 часть ДНК плазмиды pBR322. Ковалентно соедините их, обработав ДНК-лигазой фага T4. Проведите трансфекцию клеток RD102, проводя отбор либо на устойчивость к тетрациклину, либо на устойчивость к ампициллину.

предыдущая главасодержаниеследующая глава






Генетики нашли в ДНК мужчин следы древней «войны кланов»

Европейцы и азиаты посветлели независимо друг от друга

Современные высшие растения возникли в результате сдвига экспрессии генов

Генетики нашли «семью», состоящую из 13 миллионов человек

Прочитали рекордный по длине геном мексиканской амбистомы - 32 миллиарда пар нуклеотидных оснований

ДНК человека, умершего в 1827 году, восстановили без его останков

Генетики изучили жителей Новой Гвинеи

Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru