НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Методика 3. Быстрый метод получения трансдуцирующего фага P22

  1. Засейте 1 мл бульона LB тем штаммом, который хотите использовать в качестве донора. Вырастите культуру до насыщения. После инкубации в течение ночи при 37°С культура должна содержать 2·109 клетка/мл.
  2. Заразите фагом P22 (HT, int-) с множественностью 0,01-0,1 фаговых частиц на клетку. Обычно к 1 мл ночной культуры добавляют 4 мл бульона P22. Бульон P22 - это бульон LB с полным количеством солей E (1x), содержащий 0,2% глюкозы и 5·106 БОЕ/мл фага P22 (HT, int-). В такой среде фаг довольно стабилен при комнатной температуре. Используемый мутант фага P22 осуществляет неспецифическую трансдукцию с повышенной частотой (HT; Schmieger, 1972) и не образует устойчивых лизогенов (int-).
  3. Инкубируйте в течение 5-18 ч при 37°С при встряхивании. Культура может не просветлеть.
  4. Низкоскоростным центрифугированием удалите клетки и их обломки.
  5. Надосадочную жидкость перенесите в пробирку с 0,5 мл хлороформа, перемешайте в смесителе.
  6. Оттитруйте лизат (см. методику 1). Он должен содержать 1010-1011 частиц фага в 1 мл.
предыдущая главасодержаниеследующая глава






Генетики нашли в ДНК мужчин следы древней «войны кланов»

Европейцы и азиаты посветлели независимо друг от друга

Современные высшие растения возникли в результате сдвига экспрессии генов

Генетики нашли «семью», состоящую из 13 миллионов человек

Прочитали рекордный по длине геном мексиканской амбистомы - 32 миллиарда пар нуклеотидных оснований

ДНК человека, умершего в 1827 году, восстановили без его останков

Генетики изучили жителей Новой Гвинеи

Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru