НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Методика 13. Удаление бромистого этидия из ДНК, находящейся в растворе CsCl

Экстракция изопропанолом или бутанолом

  1. Добавьте 1 объем ДНК в растворе CsCl, плотность которого равна плавучей плотности ДНК, и бромистый этидий в пробирку, вмещающую по меньшей мере 10 таких объемов. Пробирку нужно взять такую, чтобы ее можно было герметически закупорить и центрифугировать (можно использовать полипропиленовые или стеклянные пробирки, но ни в коем случае не пробирки из поликарбоната).
  2. Добавьте 1 объем изопропанола или бутанола, насыщенного водным раствором, содержащим 5 М NaCl, 10 мМ трис и 1 мМ Na3-ЭДТА (рН 8,5).
  3. Герметично закройте пробирку и перемешайте содержимое. Это нужно проделывать в перчатках.
  4. Повторяйте экстракцию до тех пор, пока полностью не исчезнет видимая окраска. После этого экстрагируйте еще один раз. Чем выше концентрация ДНК, тем больше требуется проводить экстракций.
  5. Добавьте 2 объема H2O.
  6. Добавьте 6 объемов этанола и оставьте при -20°С на время от 1 ч до нескольких дней.
  7. Отцентрифугируйте осадок.
  8. Промойте осадок 70%-ным этанолом.
  9. Слейте надосадочную жидкость и высушите осадок.
  10. Растворите осадок в 100 мкл 10 мМ трис и 1 мМ Na3-ЭДТА (рН 7,5).
предыдущая главасодержаниеследующая глава






Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru