НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Методика 14. Образование гибридных фагов λgt

I. Расщепление ДНК

  1. Расщепите по отдельности ДНК вектора и встраиваемую ДНК. Если использовать примерно по 5 мкг каждой из этих ДНК, то при трансфекции должно получиться около 5·104 гибридов. ДНК в буфере: ДНК 50 мкг/мл или больше, буфер для рестрикции с низким, средним или высоким содержанием соли (см. приложение 7), 10-4 М Na2-ЭДТА.
  2. Добавьте 1/10 объема 0,1 М MgSO4, чтобы получить 0,01 М MgSO4.
  3. Добавьте эндонуклеазу и инкубируйте в течение 10 мин при 37°С. Проведя электрофорез в геле, определите то количество фермента, которое дает полное расщепление.
  4. Повторите этап 3.
  5. Прогрейте в течение 3 мин при 70°С, чтобы инактивировать эндонуклеазу (см. приложение 7).
  6. Если будете использовать эту ДНК для упаковки in vitro, то инкубируйте в течение 15 мин при 50°С. Если же будете использовать ее в трансфекции, то быстро охладите до 0°С.
предыдущая главасодержаниеследующая глава






Генетики нашли в ДНК мужчин следы древней «войны кланов»

Европейцы и азиаты посветлели независимо друг от друга

Современные высшие растения возникли в результате сдвига экспрессии генов

Генетики нашли «семью», состоящую из 13 миллионов человек

Прочитали рекордный по длине геном мексиканской амбистомы - 32 миллиарда пар нуклеотидных оснований

ДНК человека, умершего в 1827 году, восстановили без его останков

Генетики изучили жителей Новой Гвинеи

Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru