Отдельной колонией с чашки засейте 10 мл бульона LB в колбе на 125 мл. Инкубируйте в течение 20 ч при 37°С.
Разведите эту бактериальную культуру 1:100 в бульоне LB. На одну трансфекцию используйте 5 мл бульона (обычно засевают 50 мл бульона в колбе на 500 мл). Инкубируйте на качалке при 37°С, пока культура не достигнет плотности, при которой A600=0,6-0,7. На это уходит обычно 2-3 ч. При A600=0,3 добавьте тимидин до концентрации 50 мкг/мл.