НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Приложение 9. Рестрикционные карты

I. Карты фага λ и векторов, образуемых на основе фага λ

Ранее были описаны некоторые из векторов, образованных на основе фага λ, которые были использованы для клонирования чужеродной ДНК и оказались очень удобными. На основе фага λ сконструировано много векторов. Однако большинство из них либо не было использовано для клонирования чужеродной ДНК, либо было сконструировано не самым оптимальным образом.

На рис. 1 приведена карта генома фага λ, на которой указаны координаты (в долях от длины генома λ+) многих фаговых генов. Под картой приведены некоторые делении и замещения. Изменение размера ДНК фага λ с делецией или замещением (в kb) приводится под названием затронутой области (например, область иммунности i21 на 2,45 kb короче замененной области у фага λ+). Под линией, изображающей замещение, указан размер этой не принадлежащей фагу λ последовательности (в kb). Приведены также координаты концов делений и замещений на карте фага λ.

Рис. 1. Карта фага λ
Рис. 1. Карта фага λ

На рис. 2 и 3 показаны сайты расщепления ДНК фага λ рестриктирующими эндонуклеазами. Координаты этих сайтов определили Филипсен и Девис (Philipsen, Davis, готовится к печати) методами электронной микроскопии и электрофореза в агарозном геле, при помощи которых были получены сравнительные данные о длинах и подвижностях фрагментов ДНК фага λ и фрагментов ДНК φX174. Результаты, полученные методами электронной микроскопии и электрофореза, очень хорошо согласуются для всех фрагментов, за исключением тех, которые находятся вблизи координаты 0,85. Длины фрагментов из этой области, определенные с помощью электронного микроскопа, несколько превосходили те длины, которые были установлены по электрофоретической подвижности. Данные, представленные на карте, получены при усреднении результатов этих двух определений. Приведенная карта учитывает также и результаты работы Дэниелса с сотрудниками (Daniels et al., 1980). Полученные ими результаты не очень расходятся с нашими определениями. Длина ДНК фага λ+ определена равной 49,0 kb. Цифры над черточками указывают размеры соответствующих фрагментов (в kb). Цифры под черточками обозначают координаты сайтов рестрикции в долях длины ДНК λ+.

Рис. 2. Сайты расщепления ДНК фага λ рестриктирующими эндонуклеазами
Рис. 2. Сайты расщепления ДНК фага λ рестриктирующими эндонуклеазами

Рис. 3
Рис. 3

На рис. 4-14 ДНК векторов λ перекрестно заштрихованы. Делении обозначены тонкими линиями, над которыми приведены их названия. Те последовательности, которые происходят не из фага λ, заполнены точками и нарисованы выше основной линии ДНК λ, (например, область иммунности фага 21 на рис. 9 или фрагмент ДНК фага φ80 на рис. 10). На рис. 11 и 12 в правом плече показан также маленький кусочек ДНК фага φ80. Его присутствие удаляет сайт HindIII из ДНК фага λ. Те последовательности, которые имеются в векторе, но обычно отсутствуют в гибридах (т. е. замещаемые области векторов замещения), обозначены заполненными точками прямоугольниками, расположенными выше линии ДНК фага λ. Под линиями ДНК фага λ приведены координаты разрывов в последовательности ДНК фага λ. Над линиями ДНК указаны длины сегментов в kb. Указаны также полные длины левого и правого плеча в kb.

Рис. 4. Карта вектора λgtl-λB (EcoRI)
Рис. 4. Карта вектора λgtl-λB (EcoRI)

Рис. 5. Карта вектора λgt4 (EcoRI)
Рис. 5. Карта вектора λgt4 (EcoRI)

Рис. 6. Карта вектора λgt5-lac5 (EcoRI)
Рис. 6. Карта вектора λgt5-lac5 (EcoRI)

Рис. 7. Карты фага λ и вектора λgt7-ara6 (EcoRI)
Рис. 7. Карты фага λ и вектора λgt7-ara6 (EcoRI)

Рисунки 8-10
Рисунки 8-10

Рис. 11. Карта вектора λ590 (Hind III)
Рис. 11. Карта вектора λ590 (Hind III)

Рис. 12. Карта вектора λ760 (Hind III)
Рис. 12. Карта вектора λ760 (Hind III)

Рис. 13. Карта вектора λgt30-Ec6 (Sal I, Xho I)
Рис. 13. Карта вектора λgt30-Ec6 (Sal I, Xho I)

Рис. 14. Карта вектора λgt40 (Sst I)
Рис. 14. Карта вектора λgt40 (Sst I)

Рис. 15
Рис. 15

Литература

Daniels D. L., de Wet J. R., Blattner F. R., 1980. J. Virol, (в печати).

предыдущая главасодержаниеследующая глава






Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru