НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Обоснование и план эксперимента

При многих перестройках, индуцированных Tn10, происходит утрата детерминант устойчивости к лекарственным препаратам. Поэтому если взять штамм, содержащий вставку Tn10 в интересующей нас области, и проводить отбор клеток, утративших лекарственную устойчивость, то можно получить популяцию, сильно обогащенную делениями (или инверсиями) вблизи исходного сайта локализации Tn10.

Такой эксперимент проще провести, если использовать метод отбора, разработанный недавно Бохнером и др. (Bochner et al., 1980). Метод этот позволяет проводить прямой отбор клеток, чувствительных к тетрациклину. С помощью этого метода легко можно получить популяцию спонтанных мутантов, а уже затем проверять их на наличие делеций желаемого типа. В основе этого метода отбора лежит предположение (не доказанное), что тетрациклин проникает в клетки с помощью механизма, предназначенного для транспорта железа; эта система транспорта может блокироваться индуцибельным детерминантом устойчивости Tn10. Когда система поглощения железа блокирована, клетки оказываются неспособными расти на среде с низкими концентрациями железа. Добавляя в среду соединения, захватывающие железо, можно сделать рост полностью индуцированных клеток TetR зависимым от железа, добавляемого извне.

Описанный ниже эксперимент включает поиск делеций, вызываемых Tn10, встроенным вблизи his-оперона. Кроме делеций могут встречаться и инверсии, которые препятствуют экспрессии гена hisD, либо нарушая целостность кодирующей последовательности этого гена, либо отделяя ген hisD от его промотора.

Трансдукционные скрещивания с донорным фагом, выращенным на ряде точковых мутантов, позволяют выявить, действительно ли произошла делеция, и определить размер удаленного при этом участка гена hisD.

предыдущая главасодержаниеследующая глава






Генетики нашли в ДНК мужчин следы древней «войны кланов»

Европейцы и азиаты посветлели независимо друг от друга

Современные высшие растения возникли в результате сдвига экспрессии генов

Генетики нашли «семью», состоящую из 13 миллионов человек

Прочитали рекордный по длине геном мексиканской амбистомы - 32 миллиарда пар нуклеотидных оснований

ДНК человека, умершего в 1827 году, восстановили без его останков

Генетики изучили жителей Новой Гвинеи

Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru