Эксперимент 5. Выделение и характеристика точковых мутантов фага λ, полученных с помощью гидроксиламина

Введение

Часто бывает необходимо получить мутацию в фаговом геноме какого-нибудь вектора или клона, не прибегая к скрещиваниям, которые могли бы внести нежелательную чужую информацию (например, сайты рестрикции). С другой стороны, часто бывает нужно получить мутации в клонированной чужеродной ДНК. Для этого используется та же самая методика; нужно лишь, чтобы функционирование встроенной ДНК приводило к такому фенотипу, который можно выявить. Мутации фага λ используются как внешние маркеры при скрещиваниях, проводимых при картировании мутаций в клонированном фрагменте, или как такие маркеры, которые дают уверенность, что рекомбинация произошла внутри клонированного фрагмента.

В качестве модели клонированного фрагмента мы используем ген ТЕМ-β-лактамазы, который оказался в фаге λ в результате встраивания перемещающегося элемента Tn2.