Обоснование и план эксперимента

Как индуцировать мутации в фаге λ гидроксиламином in vitro указано в методике 8. Это весьма обычный метод мутагенизирования как фага, так и выделенной в очищенном виде ДНК. Его преимущество заключается в высокой специфичности (индуцируются транзиции G→A) и большой эффективности. При работе с умеренным фагом контролировать эффективность мутагенеза очень просто - достаточно следить за появлением среди выжившего фага мутаций, приводящих к образованию прозрачных бляшек. По этой методике можно выделить амбер-мутантов фага λ. С помощью спот-теста на комплементацию (методика 10) их можно охарактеризовать по их комплементации с амбер-мутациями в большинстве известных генов фага λ. Комплементационный анализ позволит определить положение полученных мутаций на карте. Мутации по ТЕМ-β-лактамазе можно использовать для картирования делеционных мутантов в этой модели клонированного фрагмента (эксперимент 6).