НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Обсуждение

В этой методике используется тот факт, что, когда β-лактамаза выделяется в среду, она разрушает ампициллин и спасает оказавшиеся рядом чувствительные gal+-клетки. Такие спасенные gal+-клетки сбраживают галактозу, восстанавливают тетразолий и образуют вокруг бляшки красный ореол. Для обеспечения роста фага на чашки высевают также и gal--клетки. Эти gal--клетки устойчивы к ампициллину (но не выделяют β-лактамазы). gal--Бактерии могут выступать в роли клеток-хозяев для фага, но не восстанавливают тетразолий (не дают красной окраски). Таким образом, клетки gal-AmpR (DB4383) могут расти по всей чашке, но не дают окраски. Клетки же gal+AmpS (DB6430) растут (и дают окраску) лишь вблизи бляшки фага λ, продуцирующего β-лактамазу (bla+).

Важно подобрать концентрацию ампициллина на таких чашках для каждой используемой партии этого препарата. Это должна быть та минимальная концентрация ампициллина, при которой подавляется рост клеток DB6430 в газоне.

предыдущая главасодержаниеследующая глава









© Злыгостев А.С., подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2019
При использовании материалов активная ссылка обязательна:
http://genetiku.ru/ 'Генетика'

Рейтинг@Mail.ru