Обсуждение

В этой методике используется тот факт, что, когда β-лактамаза выделяется в среду, она разрушает ампициллин и спасает оказавшиеся рядом чувствительные gal⁺-клетки. Такие спасенные gal⁺-клетки сбраживают галактозу, восстанавливают тетразолий и образуют вокруг бляшки красный ореол. Для обеспечения роста фага на чашки высевают также и gal^--клетки. Эти gal^--клетки устойчивы к ампициллину (но не выделяют β-лактамазы). gal^--Бактерии могут выступать в роли клеток-хозяев для фага, но не восстанавливают тетразолий (не дают красной окраски). Таким образом, клетки gal^-Amp^R (DB4383) могут расти по всей чашке, но не дают окраски. Клетки же gal⁺Amp^S (DB6430) растут (и дают окраску) лишь вблизи бляшки фага λ, продуцирующего β-лактамазу (bla⁺).

Важно подобрать концентрацию ампициллина на таких чашках для каждой используемой партии этого препарата. Это должна быть та минимальная концентрация ампициллина, при которой подавляется рост клеток DB6430 в газоне.