НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Обсуждение

Обычно ДНК фага λ выделяют из препарата фага фенольной экстракцией, проводя затем экстракцию эфиром, чтобы удалить растворенный фенол. Нами обнаружено, что при использовании формамидного метода полученная ДНК содержит меньше одноцепочечных разрывов и обладает большей инфекционностью. Возможно, что при этом не удаляются фаговые белки, остающиеся в виде "теней" бактериофага. Мы не наблюдали, однако, чтобы при использовании таких препаратов ДНК каким-либо образом иигибировалась работа большинства ферментов. По-видимому, при обработке формамидом ДНК фага выпрыскивается через хвостовой отросток.

А.

  1. Ns2-ЭДТА добавляют для того, чтобы хелатировать ионы Mg2+.
  2. Выпрыскивание ДНК происходит, очевидно, очень быстро. Однако длительный контакт с формамидом, по-видимому, не оказывает на ДНК повреждающего действия.
  3. Воду добавляют для того, чтобы CsCl не выпал в осадок после добавления этанола.
  4. (Этапы 4 и 5); ДНК быстро образует преципитат, и обычно для этого не требуется охлаждать раствор. Если центрифугирование не будет таким кратковременным, то ДНК трудно будет ресуспендировать.
  5. (Этап 6); осадок споласкивают, чтобы удалить остатки CsCl и формамида.
  6. (Этапы 7 и 8); ДНК быстрее всего растворяется при очень низкой концентрации соли. Однако при длительном хранении (в течение месяцев) ДНК меньше деградирует при более высоких концентрациях соли и Na2-ЭДТА.

Б.

Эта методика аналогична приведенной выше, но в данном случае добавление и удаление формамида проводят с помощью диализа. При этом не требуется осаждения этанолом. В формамиде могут содержаться примеси, которые не удаляются при осаждении спиртом. Очевидно, все то, что в процессе диализа может поступать внутрь мешка, может при последующем диализе удаляться оттуда.

Эта методика, по-видимому, лучше всего подходит для получения больших количеств ДНК фага λ, так как большой осадок ДНК после осаждения этанолом может растворяться плохо.

предыдущая главасодержаниеследующая глава






Генетики нашли в ДНК мужчин следы древней «войны кланов»

Европейцы и азиаты посветлели независимо друг от друга

Современные высшие растения возникли в результате сдвига экспрессии генов

Генетики нашли «семью», состоящую из 13 миллионов человек

Прочитали рекордный по длине геном мексиканской амбистомы - 32 миллиарда пар нуклеотидных оснований

ДНК человека, умершего в 1827 году, восстановили без его останков

Генетики изучили жителей Новой Гвинеи

Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru