НОВОСТИ    БИБЛИОТЕКА    СЛОВАРЬ-СПРАВОЧНИК    КАРТА САЙТА    ССЫЛКИ    О САЙТЕ

предыдущая главасодержаниеследующая глава

Методика 19. Способность гибридного фага к комплементации в клетках E. coli

I. Литический отбор из пула гибридов E. coli

  1. Вырастите ауксотрофы до поздней экспоненциальной фазы в среде М9 + 0,2% мальтозы + необходимые пищевые добавки (40 мкг/мл каждой из необходимых аминокислот). Определите концентрацию клеток.
  2. Осадите клетки центрифугированием (8000 об/мин, 5 мин). Ресуспендируйте в 1/10 объема 10 мМ MgSO4 или в таком объеме, чтобы получилось 1010 клетка/мл.
  3. Адсорбируйте 2·106 частиц фага (или менее) на 2·109 клеток в течение 15 мин при 37°С. Эффективность высева комплементирующего фага равна примерно 1.
  4. Смешайте с 2,5 мл мягкого (~0,6%-ного) агара М9 и высейте на чашку. При 37°С для образования бляшек комплементирующего фага может потребоваться 6-40 ч.
  5. Проведите очистку бляшек на неселективной чашке (чашке LB) и повторно проверьте комплементацию.
предыдущая главасодержаниеследующая глава






Ученые добавили две новые буквы в генетический код

В наших генах есть два «неандертальских процента»

Сколько у вас хромосом? История одной мутации

Инвестиции в редактирование генома

Распространение артритов объяснили исходом человека из Африки

Обнаружены гены, отвечающие за чувствительность к магнитному полю Земли

Вредные мутации в геноме усиливают влияние друг друга

Найдены 6 500 генов, отличающие мужчин от женщин

Антропологи извлекли ДНК древних людей из пещер без костных останков

Расшифровка генома ячменя принесла больше вопросов, чем ответов

Сибирские генетики сделали первые шаги к управлению фотосинтезом

Александр Баев – один из пионеров исследований генома человека

215 петабайт в одном грамме ДНК




© Злыгостев Алексей Сергеевич, подборка материалов, оцифровка, статьи, оформление, разработка ПО 2013-2018
При копировании материалов проекта обязательно ставить активную ссылку на страницу источник:
http://genetiku.ru/ 'Genetiku.ru: Генетика'

Рейтинг@Mail.ru