Выше описывалось, как проводить реакцию в объеме 25 мкл. Можно успешно проводить реакцию и в объемах менее 10 мкл.
Большинство коммерческих препаратов ДНК-полимеразы I E. coli содержит существенные примеси ДНКазы, так что добавление ДНКазы (разд. III данной методики) может оказаться ненужным.
Литература
Rigby P. W. J., Dieckmann M., Rhodes C., Berg P., 1977. Labeling deoxyribonucleic acid to high specific activity in vitro by nick translation with DNA polymerase I, J. Mol. Biol., 113, 237.
Какой сюрприз! Участник фаговых курсов 1951 г. Вацлав Шибальский явно испугался когда обнаружил, что колония сильно слизистого устойчивого к хлорамфениколу мутанта Е. coli выросла от поверхности агара до самой крышки чашки Петри [Microbial Genetics Bull., № 5, 10 (1951)1. Этому способствовала только что разработанная методика градиентных чашек [Science, 116, 46-48 (1952)]