II. Электронная микроскопия гетеродуплексов

А. Расправляющий раствор

1. 10 мкл препарата гетеродуплексов.
2. 10 мкл раствора, содержащего 1 М трис, 0,1 М Na2-ЭДТА (рН 8,5) и 0,5 мг/мл цитохрома c.
3. 45 мкл H2O.
4. 35 мкл формамида.
5. Наливайте 50 мкл.

Б. Нижняя фаза (приготавливается не ранее, чем за 5 мин до использования)
      0,01 М трис и 10-3 М Na2-ЭДТА (рН 8,5), 10%-ный раствор формамида.

Литература

Davis R. W., Davidson N., 1968. Electron-microscopic visualization of deletion mutations, Proc. Natl. Acad. Sci., 60, 243.

Davis R. W., Simon M. N., Davidson N., 1971. Electron microscope heteroduplex methods for mapping regions of base sequence homology in nucleic acids, Methods Enzymol., 21 D, 413.

Ferguson J., Davis R. W., 1978. Quantitative electron microscopy of nucleic acids. In: Advanced techniques in biological electron microscopy II (Koehler J. K., ed.), vol. 2, p. 123, Springer-Verlag, Berlin.

Westmoreland B. C., Szybalski W., Ris H., 1969. Mapping of deletions and substitutions in heteroduplex DNA molecules of bacteriophage lambda by electron microscopy, Science, 163, 1343.