Методика 21. Перенос ДНК на нитроцеллюлозу или диазотированную бумагу

I. Перенос из агарозных гелей

А. Агарозный гель

1. Проведите электрофоретическое разделение ДНК, используя горизонтальный аппарат и гель размера 14,5×13,5×0,8 см (150 мл). Обычно мы используем 0,7%-ную агарозу и трис-ацетатный буфер.
2. В каждую лунку длиной 0,4 см можно нанести до 5 мкг ДНК, расщепленной рестриктирующей эндонуклеазой. Мы наносим около 1 мкг расщепленной бактериальной ДНК.
3. В буфер для электрофореза добавлен бромистый этидий (0,5 мкг/мл). При фотографировании гель освещают коротковолновым УФ-светом.

Б. Расщепление больших молекул ДНК в геле посредством депуринизации

Если используемая ДНК получена с помощью метода быстрого выделения, то де